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基础信息Product information

产品名称：

兔附睾上皮细胞

产品简介：

兔附睾上皮细胞公司正在出售的产品：neuro-2a+luc小鼠脑神经瘤细胞荧光素酶标记 MIA PaCa-2 (人胰腺癌细胞) 兔视网膜微血管内皮细胞 HERC4 E3泛素蛋白连接酶抗体小鼠骨髓造血干细胞己醛醣酸盐水解酵素抗体人胰腺上皮细胞磷酸化三磷酸腺苷依赖解旋酶DDX3抗体

产品型号：

厂商性质：经销商

访问量：766

更新时间：2024-11-05

产品特性Product characteristics

兔附睾上皮细胞

兔附睾上皮细胞

商品属性：

组织来源	产品规格	细胞形态	货号
附睾：	5×105cells/T25细胞培养瓶	上皮细胞样	YS-01X8345

细胞简介：

兔附睾上皮分离自附睾组织；附睾（Epididymis）是一个由曲折、细小的管子构成的器官，一端接着输精管（Ductusdeferens），一端接着睾丸（Testis）的曲细精管，具体结构主要包括输出小管和附睾管。附睾紧贴睾丸的上端和后缘，可分为头、体、尾三部。精子离开睾丸后通过输出小管进入附睾。附睾具有暂存精液并分泌附睾液营养精子的功能，以促进精子的进一步成熟附睾的功能是暂存精子，促进精子的进一步成熟。精子在附睾内获得运动能力，总共停留8～17天，终达到功能上的成熟。在这个过程中，精子除了自身的因素，还受到附睾微环境的影响，这包括了一系列的物理、化学变化和精子形态的改变。可以说，附睾微环境正常稳定是附睾发挥促成熟这一功能的必要条件。若附睾的功能发生异常，精子则不能成熟，引起不育。附睾上皮含有主细胞、基细胞、亮细胞等几种类型细胞。基细胞，其顶部离附睾管腔有一定距离，在附睾各部分，其形态没有差别，一般认为是贮备细胞；另一种主细胞，是维持附睾生理功能的物质基础，在各区段的主细胞形态结构差别很大，这也反映出各区段的生理功能的差异。除上皮细胞外，附睾的管壁组织结构也有规律性的变化，附睾管起始段平滑肌有自发地节律性收缩，而尾部平滑肌就没有这种特点，仅在射精一瞬间出现强烈的节律收缩。作为负责提供适合精子成熟微环境的附睾，具有活跃的分泌与吸收功能。其中，附睾上皮的电解质和水分的转运，对保持附睾内合适的离子浓度和酸碱度，为精子成熟提供适宜的环境起着相当重要的作用。睾丸的支持细胞每天能产生大量睾网液，如一只公羊每天约能分泌40毫升睾网液，而从附睾排出的只不过几百微升，也就是说睾丸分泌液有99%被附睾上皮重新吸收回体内。动物实验表明，结扎输精管时睾丸不会肿胀，但若结扎睾丸输出小管，睾丸第二天就会肿胀，这就充分证实了附睾存在着强有力的吸收功能，但是重新吸收的意义尚不清楚。体外培养附睾上皮细胞对精子的发育、成熟，育，附睾生理基础功能研究具有重要意义。

原代细胞的培养条件：

　　一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养

　　1、细胞要通过充分漂洗，以尽量除去消化液的毒性；

　　2、细胞接种时浓度要稍大一些，至少为5×108细胞/L；

　　3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养；

　　4、胎牛血清浓度为10%-80%

　　5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养；

　　6、在起始的2天中尽量减少振荡，以防止刚贴壁的细胞发生脱落，漂浮；

　　7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状，应将原代细胞换液；

　　8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时，应将细胞悬液经低速离心后换液。

　　二、悬浮细胞培养

　　1、原代培养时要尽量去除红细胞；

　　2、短期培养，可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行；

　　3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内，进行分瓶试验；

　　4、长期培养时，淋巴细胞中要加入生长因子，白血病细胞中要加入少量的原患者血清，以利细胞生长；

　　5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次；

　　6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。

方法简介：

实验室分离的兔附睾上皮采用胶原酶消化结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：

实验室分离的兔附睾上皮经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件：鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基：含FBS、EGF、Hydrocortisone、肾上腺素、甲状腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：上皮细胞样

传代特性：可传1-2代

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

兔附睾上皮体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

兔附睾上皮细胞

细胞传代及冻存：

细胞传代步骤

细胞冻存步骤

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

原代细胞的培养方法一般有以下4种：

　　① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

兔附睾上皮细胞