服务热线
021-59989018
产品简介:
产品型号:
厂商性质:经销商
访问量:731
更新时间:2024-11-05
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用,不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗!
产品名称:兔骨骼肌微血管内皮细胞
组织来源:骨骼肌
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
培养信息:
包被条件:PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:内皮细胞样
传代特性:可传2-3代
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔骨骼肌微血管内皮体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞简介:
兔骨骼肌微血管内皮分离自四肢肌肉组织;骨骼肌又称横纹肌,肌肉中的一种,约占全身重量的40%。骨骼肌纤维为长柱形的多核细胞,肌膜的外面有基膜紧密贴附。属于横纹肌,横纹肌还包括心肌与内脏横纹肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每块肌肉都是具有一定形态、结构和功能的器官,有丰富的血管、淋巴分布,在躯体神经支配下收缩或舒张,进行随意运动。微血管又称毛细血管。分布于各种组织和细胞间的微细的血管。介于微动脉和微静脉之间。平均直径7-9微米,数量极多,成网状分布。管壁由一层内皮细胞及一薄层基膜组成,厚约0.5微米。基膜外面有薄层结缔组织,其中有纤维细胞、巨噬细胞和周细胞等。细的微血管由一个内皮细胞围成管腔,较粗的微血管由2-3个内皮细胞围成。分布于肌肉组织、神经组织和结缔组织中的微血管,内皮细胞间为缝隙连接(缝隙宽150埃),称连续微血管。血管内皮细胞在器官和组织的结构和功能上起着非常重要的作用。并与多种疾病的发生与发展有关。近年来血管内皮细胞在炎症、休克等一系列病理生理改变中的重要性愈来愈受到人们的重视。研究发现,不同来源的内皮细胞在生物学特征、结构和功能等方面均存在一定差别,而同是微血管内皮细胞,它们又存在器官和组织的特异性。骨骼肌组织是动物体内含量多的组织,肌肉组织供血丰富,是研究内皮细胞功能和血管生成的理想靶组织。
方法简介:
实验室分离的兔骨骼肌微血管内皮采用胶原酶消化结合差速贴壁法、专用培养基筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的兔骨骼肌微血管内皮经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养步骤:
一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
收到细胞如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作
公司正在出售的产品:
小鼠早期生长反应因子1 英文名称: Mouse Early Growth Response Protein 1 英文缩写: EGR-1
小鼠弹性蛋白 英文名称: Mouse Elastin 英文缩写: ELN
小鼠X 英文名称: blood coagulation factor X 英文缩写: FX
小鼠XIII B 英文名称: Mouse Coagulation Factor XIII B Polypeptide 英文缩写: F13B
巴德-毕德氏综合征蛋白BBS6抗体
PTCD2蛋白抗体
IL17A重组小鼠 IL17 / IL17A 蛋白 Protein
蛋白激酶Bγ(PKBγ)重组蛋白 Recombinant Protein Kinase B Gamma (PKBg)
TPM4重组人 TPM4 / Tropomyosin 4 蛋白 Protein
CD28 Protein Human 重组人 CD28 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签)
LAYN Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 Layilin / LAYN 蛋白
AAT(Alpha-1Anti-tiypsin 0.5mgAAT(Alpha-1Anti-tiypsin) α-1抗(抗原)
CD28 Protein Human 重组人 CD28 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签)
EPHB1重组小鼠 EphB1 / EPHT2 蛋白 (His & GST 标签) Protein
IL20RB Protein Rat 重组大鼠 IL20RB 蛋白
CLEC10A重组人 CLEC10A / MGL1 / CD301 蛋白 (Fc 标签) Protein
小鼠血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)ELISA pcr检测试剂盒
Human Campylobacter jejuni (PEB1) ELISA Kit 人空肠弯曲菌黏附蛋白(PEB1)试剂盒
HumanN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISAKit 人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)pcr检测试剂盒分装
CLIAKitfor(NF-KapB)ELISAKit大鼠核因子κB
饮料乙醇比色法定量试剂盒20次
MouseIerleukin-2receptor,IL-2RELISAKit小鼠白介素2受体(IL-2R)试剂盒规格:96T/48T
兔骨骼肌微血管内皮细胞大鼠端粒酶(TE)试剂盒 ,英文名: TE ELISA Kit
Porcine growth hormone (GH) ELISA Kit 猪生长激素(GH)试剂盒
植物源性成分(RBCL)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
CLIAKitforLTC4ELISAKit大鼠白三烯C4
体液总脂蛋白(TotalL-Cholesterol)酶连续循环比色法定量试剂盒20次
ELISAKitHSP-70鸡热休克蛋白70