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更新时间:2024-11-05
兔棕色脂肪细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
脂肪 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X8490 |
细胞简介:
兔棕色脂肪分离自棕色脂肪组织;动物体内存在棕色和白色两种脂肪,白色脂肪堆积在皮下,负责储存多余热量;棕色脂肪负责分解引发肥胖的白色脂肪,将后者转化成二氧化碳、水和热量,本身不储存热量。棕色脂肪组织呈棕色,其特点是组织中有丰富的毛细血管,脂肪细胞内散着许多小脂滴,线粒体大而丰富,核圆形,位于细胞中央,这种脂肪细胞也称为多泡脂肪细胞。棕色脂肪组织在成年动物极少,新生儿及冬眠动物较多,在新生儿主要分布在肩胛间区、腋窝及颈后部等处。棕色脂肪组织仅在婴儿时期发挥作用,它们堆积在新生儿肩胛处,帮助维持体温。随着年龄增长,棕色脂肪会逐渐消失。终,动物体内只残存少量棕色脂肪细胞,分布于颈部和锁骨。脂肪细胞分为白色脂肪细胞和褐色(棕色)脂肪细胞,常呈白色,在婴幼儿期大量增殖,到青春期数量达到,此后数量一般不再增加。细胞内含有大量富含脂肪的小泡,称为脂质泡,富含光面内质网。此外,还有一种褐色脂肪细胞,在动物体内主要存在于肩胛骨间、颈背部、腋窝、纵隔及肾脏周围,含有高度团缩的褐色脂肪,作用是将脂质分解产热,调节体内脂质比例。
方法简介:
实验室分离的兔棕色脂肪采用胶原酶-联合消化法获得前脂肪细胞,经成脂诱导培养基诱导培养制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的兔棕色脂肪经油红O染色检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件:PLL(0.1mg/ml)
培养基:基础培养基,含FBS、EGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:梭形、多角形
传代特性:属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔棕色脂肪体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
人粘蛋白2(MUC2)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human MUC2 (Mucin 2) ELISA Kit
人粘蛋白20(MUC20)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human MUC20 (Mucin 20) ELISA Kit
人脑素受体(C1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human C1 (Cannabinoid Receptor 1, Brain) ELISA Kit
人腺苷酸环化酶相关蛋白1(CAP1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human CAP1 (Adenylate Cyclase Associated Protein 1) ELISA Kit
多聚腺苷酸结合蛋白2抗体
人分泌型球蛋白A
FGFR4重组小鼠 FGFR4 / CD334 蛋白 Protein
CGB(Chromogranin B 0.5mgCGB(Chromogranin B) 嗜铬粒素B抗原
CROT重组人 CROT 蛋白 (474 Leu/Val, His 标签) Protein
ISG15 Protein Human 重组人 ISG15 / G1P2 蛋白 (mature form)
IL34 Protein Mouse 重组小鼠 IL-34 蛋白
CGB(Chromogranin B 0.5mgCGB(Chromogranin B) 嗜铬粒素B抗原
ISG15 Protein Human 重组人 ISG15 / G1P2 蛋白 (mature form)
FGFR4重组小鼠 FGFR4 / CD334 蛋白 Protein
IL34 Protein Mouse 重组小鼠 IL-34 蛋白
CROT重组人 CROT 蛋白 (474 Leu/Val, His 标签) Protein
豚鼠白介素2(IL2)试剂盒 ,英文名: IL2 ELISA Kit
Human galanin / galanin (GAL) ELISA Kit 人甘肽/甘素(GAL)试剂盒
rabbitneuroophin4,-4ELISAKit 兔子神经营养因子4(-4)pcr检测试剂盒分装
CLIAKitforA(Mouseai-thrombieceptor)ELISAKit小鼠抗受体
线粒体复合物III蛋白表达ELISA定量试剂盒25次
Rabbitai-Monocyteaibody,AMAELISAKit兔抗单核细胞抗体(AMA)试剂盒规格:96T/48T
兔棕色脂肪细胞人抑制素A(INH-A)ELISA 试剂盒
Human ansthyretin (T) ELISA Kit 人转甲状腺素蛋白(T)试剂盒
HumanIestinalefoilfactor,ITFELISAKit 人肠三叶因子(ITF)pcr检测试剂盒分装
HumanIerleukin12,IL-12/P40试剂盒人白介素12(IL-12/P40)试剂盒规格:96T/48T
组织科萨基病毒A(CoxsackievirusA)定性试剂盒20次
HumanIPO-38ELISAKit人IPO-38蛋白(IPO38)试剂盒规格:96T/48T
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行
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