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更新时间:2024-11-05
小鼠腹膜毛细血管内皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
腹膜 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 内皮细胞样 | YS-01X8496 |
细胞简介:
小鼠腹膜毛细血管内皮分离自腹膜组织;腹膜是存在于高等脊椎动物腹腔中的一层黏膜,主要由间皮细胞和间质(结缔组织、纤维、毛细血管、淋巴管)构成,藉由结缔组织的支持所形成的一层膜状组织。腹膜包覆大部分腹腔内的器官,能分泌黏液润湿脏器的表面,减轻脏器间的摩擦。腹腔脏器的血液、淋巴和神经组织经由腹膜与外界相连;腹膜也具有吸收撞击保护内脏的效果。腹膜(peritoneum)为全身面积大、配布复杂的浆膜,由皮及少量结缔组织构成,薄而光滑,呈半透明状。衬于腹、盆腔壁内表面的腹膜称为壁腹膜(parietal-peritoneum)或腹壁薄层;覆盖腹、盆腔器表面的部分称为脏腹膜(visceral-peritoneum)腹膜或腹膜脏层。脏腹膜与壁腹膜互相延续、移行,共同围成不规则的潜在性腔隙,称为腹膜腔(peritoneal-cavity)。腹膜腔是脏、壁两层腹膜之间相互移行围成的潜在性间隙。腹膜腔内有少量浆液,在脏器活动时可减少摩擦。腹膜的主要生理功能:①分泌功能;②吸收功能;③再生能力;④防御功能;⑤调理功能。脏、壁腹膜都有丰富的毛细血管,毛细血管上有不同的孔径;腹膜的毛细血管和毛细血管后静脉是进行溶质交换的主要场所。
方法简介:
实验室分离的小鼠腹膜毛细血管内皮采用胶原酶-联合消化法结合化学试剂抑制法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的小鼠腹膜毛细血管内皮经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件:PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:内皮细胞样
传代特性:可传2-3代
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
小鼠腹膜毛细血管内皮体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
载脂蛋白D 英文名称: Human Apolipoprotein D 英文缩写: ApoD
载脂蛋白M 英文名称: Human Apolipoprotein M 英文缩写: ApoM
Human Aquaporin 1 英文名称: Human Aquaporin 1 英文缩写: AQP-1
细胞外基质蛋白 英文名称: Human Asporin1 英文缩写: ASPN1
PAN3蛋白抗体
G蛋白结合蛋白RAB10抗体
BMPR1A重组小鼠 ALK-3 / BMPR1A 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
ChRM1(muscarinic acetylcholine receptor 0.5mgChRM1(muscarinic acetylcholine receptor) 毒蕈碱型乙酰受体M1抗原
ATF2重组人 ATF2 蛋白 (His & GST 标签) Protein
ACLY Protein Human 重组人 ACLY / acly / ATP citrate lyase 蛋白 (His 标签)僀Ꝙ僀
ChRM1(muscarinic acetylcholine receptor 0.5mgChRM1(muscarinic acetylcholine receptor) 毒蕈碱型乙酰受体M1抗原
ACLY Protein Human 重组人 ACLY / acly / ATP citrate lyase 蛋白 (His 标签)
BMPR1A重组小鼠 ALK-3 / BMPR1A 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
PLAUR Protein Mouse 重组小鼠 PLAUR / CD87 / uPAR 蛋白 (His & Fc 标签)
ATF2重组人 ATF2 蛋白 (His & GST 标签) Protein
植物草酸氧化酶(OxO)ELISA 试剂盒
Human ai actin aibody (AAA) ELISA Kit 人抗肌动蛋白抗体(AAA)试剂盒
swinemajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/SLAⅢELISAKit 猪主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/SLAⅢ)试剂盒分装
ADVIgMIII腺病毒IgMⅢ型(间接法二步法)
血液合成酶总活性比色法定量试剂盒20次
Mousesolubleplateletendothelialcelladhesionmolecule1,sPECAM-1ELISAKit小鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)试剂盒
小鼠腹膜毛细血管内皮细胞大鼠分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)试剂盒 ,英文名: SFRP5 ELISA Kit
Rat beta hydroxybyric acid (beta OHB) ELISA Kit 大鼠β羟(βOHB)试剂盒
RatVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAkit 大鼠血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)试剂盒分装
CLIAKitforDPYSL2(humandihydropyrimidinase-like2)ELISAKit人二氢酶样2
细胞葡萄糖-6-0酸脱氢酶(G6PD)活性酶动力比色法定量试剂盒50次
Rathepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit大鼠肝细胞生长因子(HGF)试剂盒
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行
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