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更新时间:2024-11-05
小鼠颈动脉血管平滑肌细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
动脉 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X8507 |
细胞简介:
小鼠颈动脉平滑肌分离自颈动脉组织;颈动脉存在于脊椎动物颈部的动脉。有颈外动脉和颈内动脉。前者分布至头顶部和颜面部。后者进入颅内分布至脑和眼眶内。在发生时,鳃弓中不形成鳃的下颌弓,所以,从大动脉也不分入鳃动脉和出鳃动脉。从腹大动脉的前方发出颈外动脉,颈内动脉是通向第三鳃弓的血管延伸而形成的,但在某些鱼类、有尾两栖类和爬行类中,这一血管也将一些血液送至大动脉根。其它的高等脊椎动物的大动脉根,在第三、第四大动脉弓之间消失,所以,其第三大动脉弓形成纯粹的颈动脉。在相当于第三、第四大动脉弓之间的腹行大动脉的部分称为颈总动脉干(common co-rotid trunk);高等脊椎动物,是由颈总动脉干分为左、右颈总动脉,然后再各分支为颈外动脉和颈内动脉。颈动脉是将血液由心脏输送至头、面、颈部的大血管,是脑的主要供血血管之一,由内膜、平滑肌层及外膜层构成。与其相关常见疾病为颈动脉狭窄,颈动脉狭窄导致的缺血症状主要包括,头晕、记忆力、定向力减退、意识障碍、黑朦、偏侧面部和/或肢体麻木和/或无力、伸舌偏向、言语不利、不能听懂别人说的话等。研究颈动脉平滑肌细胞的体外培养,为研究治疗颈动脉狭窄提供一个细胞模型具有重要意义。
方法简介:
实验室分离的小鼠颈动脉血管平滑肌采用-胶原酶联合消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的小鼠颈动脉血管平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传2-3代左右
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
小鼠颈动脉血管平滑肌体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
土壤碱性蛋白酶 可见分光光度法 50管/24样
FDA水解酶试剂盒 可见分光光度法 50管/24样
土壤酸性蛋白酶试剂盒 可见分光光度法 50管/24样
土壤漆酶测试盒 可见分光光度法 50管/48样
Intersectin 2抗体
高迁移率族蛋白2重组兔单克隆抗体
PVR重组小鼠 CD155 / PVR 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
CK7(Cytokeratin 7 0.5mgCK7(Cytokeratin 7)human 细胞角蛋白7抗原
TSC22D1重组人 TSC22D1 蛋白 Protein
IFNA7 Protein Human 重组人 Interferon alpha 7 / IFNA7 蛋白 (Fc 标签)
SCARB1 Protein Mouse 重组小鼠 SCARB1 / CD36L1 / CLA-1 蛋白
CK7(Cytokeratin 7 0.5mgCK7(Cytokeratin 7)human 细胞角蛋白7抗原
IFNA7 Protein Human 重组人 Interferon alpha 7 / IFNA7 蛋白 (Fc 标签)
PVR重组小鼠 CD155 / PVR 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
SCARB1 Protein Mouse 重组小鼠 SCARB1 / CD36L1 / CLA-1 蛋白
TSC22D1重组人 TSC22D1 蛋白 Protein
小鼠17-酮类固醇(17-KS)ELISA pcr检测试剂盒
Human gasin (Gasin) ELISA Kit 人胃泌素(Gasin)试剂盒
Humanandrogeeceptor,ARELISAKit 人雄激素受体(AR)pcr检测试剂盒分装
Humancoicoopin-releasingfactor,CRF人促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)试剂盒规格:96T/48T
组织CK2α激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
HumanproteinkinaseC,PKCELISAKit人蛋白激酶C(PKC)试剂盒规格:96T/48T
小鼠颈动脉血管平滑肌细胞大鼠垂草扁桃酸(VMA)试剂盒 ,英文名: VMA ELISA Kit
Mouse 6 keto prostaglandin (6-K-PG) ELISA Kit 小鼠6酮前列腺素(6-K-PG)试剂盒
ELISA 小鼠环0酸鸟苷(mouse cGMP) 分装
CLIAKitforLF/LTFAb-Ig(HumanLactoferrinaibodyIgG)ELISAkit人乳铁传递蛋白/乳铁蛋白抗体IgG
通用型HRP-AEC底物显色试剂盒10次
ELISAKitCollagenaseI胶原酶I
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行