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更新时间:2024-11-04
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用,不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗!
产品名称:小鼠小肠平滑肌细胞
组织来源:小肠组织
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3代左右
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
小鼠小肠平滑肌分离自小肠组织;小肠位于腹中,上端接幽门与胃相通,下端通过阑门与大肠相连,是食物消化吸收的主要场所。小肠盘曲于腹腔内,上连胃幽门,下接盲肠,分为十二指肠、空肠和回肠三部分。小肠内消化是至关重要的,因为食物经过小肠内胰液、胆汁和小肠液的化学性消化及小肠运动的机械性消化后,基本上完成了消化过程,同时营养物质被小肠粘膜吸收了。小肠管壁由粘膜、粘膜下层、肌层和浆膜构成。其结构特点是管壁有环形皱襞,粘膜有许多绒毛,绒毛根部的上皮下陷至固有层,形成管状的肠腺,其开口位于绒毛根部之间。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切;构成肠腺的细胞有柱状细胞、杯状细胞、潘氏细胞和未分化细胞。柱状细胞和内分泌细胞与绒毛上皮相似,接近绒毛的柱状细胞与吸收细胞相似,绒毛深部的柱状细胞微绒毛少而短,不形成纹状缘。小肠有三种功能即消化、吸收和分泌及运动功能,其中以吸收和分泌功能为主。平滑肌细胞的收缩是负责肠蠕动的动力,促使食物向下运动。小肠平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。小肠平滑肌肉瘤是起源于小肠壁肌层、黏膜下肌层和肠壁血管平滑肌的恶性肿瘤,是小肠结缔组织恶性肿瘤中最常见的一种。因此,体外小肠平滑肌细胞的培养对研究小肠平滑肌肉瘤提供了基础和前提。此外,体外培养细胞,由于影响因素较为单一,是研究细胞功能以及相应的细胞信号转导机制的基础。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠小肠平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠小肠平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养步骤:
一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的产品:
三0酸腺苷酶 英文名称: Adenosine iphosphate 规格: 英文缩写: ATP
血管紧张素Ⅱ一型受体抗原 英文名称: Angiotensin 2 Receptor 1 Aigen 规格: 英文缩写: AT1R
抗血管紧张素‖受体︱型自身抗体 英文名称: Angiotensin 2 Receptor 1 Aoaibodies 规格: 英文缩写: AT1R-AA
血管紧张素Ⅰ 英文名称: AngiotensinⅠ 规格: 英文缩写: ANGⅠ
豚鼠免疫球蛋白E(IgE)试剂盒 ,英文名: IgE ELISA Kit
Human low density lipoprotein receptor related protein 6 (LRP-6) ELISA Kit 人低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP-6)试剂盒
MonkeySolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISAKit 猴可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforBid(HumanBH3ieractingdomaindeathagonist)ELISAKit人BH3结构域凋亡诱导蛋白
细菌尿素琼脂平板50个
RabbitLeptospiraIgG,LepIgGELISAKit兔钩端IgG(LepIgG)试剂盒规格:96T/48T
9号染色体开放阅读框79抗体
γS-crystallin蛋白抗体
SERPINA3C重组小鼠 SerpinA3c 蛋白 Protein
CCL1/TCA3/I-309 嗜酸粒细胞趋化蛋白CCL1抗原 0.5mgCCL1/TCA3/I-309 嗜酸粒细胞趋化蛋白CCL1抗原
LGALS8重组人 Galectin-8 / LGALS8 蛋白 Protein
IL17RB Protein Human 重组人 IL17RB / IL-17 Receptor B 蛋白 (Flag 标签)
ALCAM Protein Rat 重组大鼠 ALCAM / CD166 蛋白 (Fc 标签)
CCL1/TCA3/I-309 嗜酸粒细胞趋化蛋白CCL1抗原 0.5mgCCL1/TCA3/I-309 嗜酸粒细胞趋化蛋白CCL1抗原
IL17RB Protein Human 重组人 IL17RB / IL-17 Receptor B 蛋白 (Flag 标签)
SERPINA3C重组小鼠 SerpinA3c 蛋白 Protein
ALCAM Protein Rat 重组大鼠 ALCAM / CD166 蛋白 (Fc 标签)
LGALS8重组人 Galectin-8 / LGALS8 蛋白 Protein
小鼠小肠平滑肌细胞大鼠蛋白激酶抑制因子β(PKIβ)试剂盒 ,英文名: PKIβ ELISA Kit
L selectin (L-Selectin/CD62L) ELISA Kit 人L选择素(L-Selectin/CD62L)ELISA试剂
RatIerleukin3,IL-3ELISAKIT 大鼠白介素3(IL-3)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforCyclin-D2(MouseCyclin-D2)ELISAKit小鼠细胞周期素D2
细胞色素P450亚酶CYP2C8(DBF)活性荧光定量试剂盒20次
Ratfibroblastgrowthfactor-10,FGF-10ELISAKit大鼠成纤维细胞生长因子10(FGF-10)试剂盒规格:96T/48T
收到细胞如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作
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