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更新时间:2024-11-04
小鼠心脏微血管周细胞
方法简介:
公司实验室分离的小鼠心脏微血管周采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠心脏微血管周经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传1-3代左右
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
心脏组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X7644 |
细胞简介:
小鼠心脏微血管周分离自心脏组织;心脏是脊椎动物身体中最重要的一个器官,主要功能是为血液流动提供压力,把血液运行至身体各个部分。心脏由心肌构成,左心房、左心室、右心房、右心室四个腔组成。左右心房之间和左右心室之间均由间隔隔开,故互不相通,心房与心室之间有瓣膜(房室瓣),这些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心脏的作用是推动血液流动,向器官、组织提供充足的血流量,以供应氧和各种营养物质,并带走代谢的终产物(如二氧化碳、无机盐、尿素和尿酸等),使细胞维持正常的代谢和功能。心脏微血管内皮细胞是组成心脏微血管腔面单层扁平上皮样细胞,它所产生和分泌的生物活性物质对维持血管张力、调节血压、抗血栓形成等有重要作用,在心脏血管疾病的发病机制中有重要病理生理学意义。近年来大量研究表明,心肌微血管周细胞的功能和病理改变直接影响心肌细胞功能,也是诸多毒素、炎症因子及病毒等重要靶位,其作为体外研究的细胞模型在心肌缺血-再灌注发病机制和细胞间旁分泌细胞生长因子研究中起着重要作用。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
血液DNA大量提取试剂盒 5T
BloodDNAMaxiKit 10T
血液RNA试剂盒 50T
BloodRNAKit 100T
小鼠主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human ai reticulin aibody (ARA) ELISA Kit 人抗网硬蛋白抗体(ARA)试剂盒
Humancaspaseactivateddeoxyribonuclease,CADELISAKit 人胱天蛋白酶激活的脱氧核糖核酸酶(CAD)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforACA-IgG(Humanai-cardiolipinaibodyIgG)ELISAKit人抗心0脂抗体IgG
药品乙酰舒泛(acesulfameK)含量高效液相色谱法定量试剂盒20次
MouseOsteoprotegerin,OPGELISAKit小鼠骨保护素(OPG)试剂盒规格:96T/48T
APC标记人CD81单克隆抗体
卟胆原脱氨酶抗体
HA重组甲型流感 H7N2 (A/ruddy turnstone/New Jersey/563/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
P63 protein P63 抑制基因(抗原 0.5mgP63 protein P63 抑制基因(抗原)
CR2重组人 CD21 / CR2 / C3DR 蛋白 Protein
CBR3 Protein Human 重组人 CBR3 / HCBR3 / Carbonyl Reductase 3 蛋白
ACVRL1 Protein Human 重组人 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (Fc 标签)
P63 protein P63 抑制基因(抗原 0.5mgP63 protein P63 抑制基因(抗原)
CBR3 Protein Human 重组人 CBR3 / HCBR3 / Carbonyl Reductase 3 蛋白
HA重组甲型流感 H7N2 (A/ruddy turnstone/New Jersey/563/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
ACVRL1 Protein Human 重组人 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (Fc 标签)
CR2重组人 CD21 / CR2 / C3DR 蛋白 Protein
小鼠心脏微血管周细胞大鼠蛋白激酶C epsilon(PKCε)试剂盒 ,英文名: PKCε ELISA Kit
Porcine von Willebrand factor / ristocetin cofactor (VWF) ELISA Kit 猪血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)试剂盒
病毒H9亚型核酸试剂盒(荧光PCR法) 48T
CLIAKitforLp-PL-A2(Humanlipoprotein-associatedphospholipaseA2)ELISAKit人脂蛋脂酶A2
通用细胞/组织载玻片制备试剂盒20次
ELISAKitPRL鸡催乳素