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更新时间:2024-11-04
小鼠羊膜胚胎细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
胎盘组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7678 |
细胞简介:
小鼠胚胎羊膜分离自羊膜组织;羊膜为单层上皮细胞互相连接构成的薄膜。单层上皮细胞具有分泌羊水的作用。随着胚胎的生长发育,羊膜与绒毛密切紧贴,形成胎膜。胎膜随着羊膜腔逐渐扩大而呈半透明的薄膜,无血管,富有韧性(胎膜也就是羊膜腔的囊壁)。羊膜腔内充满的液体为羊水。羊膜仅覆盖在胎盘的儿体面,并不深入胎盘组织中,随着妊娠的进展羊膜腔逐渐扩大,占据整个子宫腔,羊膜是胎膜最内一层,是一层半透明的薄膜,与覆盖在胎盘、脐带的羊膜层相连接。羊膜是胎盘的最内层,与人眼结膜组织结构相似,含有眼表上皮细胞,包括结膜细胞和角膜上皮细胞生长所需要的物质,其光滑,无血管、神经及淋巴,具有一定的弹性,厚0.02~0.5mm,在电镜下,其分为五层:上皮层、基底膜、致密层、纤维母细胞层和海绵层,羊膜基底膜和羊膜基质层含有大量不同的胶元,主要为i、iii、iv、v、vii型胶原和纤维粘连蛋白、层粘连蛋白等成份,正是这些成份使羊膜可以充当“移植的基底膜"而发挥一种新的健康合适的基质。羊膜细胞主要由羊膜上皮细胞和羊膜间充质细胞组成,均具有多分化潜能,可转化为神经元,且还有合成、释放生物活性物质和神经营养因子的功能。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠羊膜胚胎采用-胶原酶联合消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠羊膜胚胎经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠合成酶试剂盒 小鼠合成酶试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠合成酶试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠合成酶试剂盒、小鼠合成酶eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠胰淀素试剂盒 小鼠胰淀素试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠胰淀素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠胰淀素试剂盒、小鼠胰淀素eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠抑制素试剂盒 小鼠抑制素试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠抑制素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠抑制素试剂盒、小鼠抑制素eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠增殖细胞核抗原试剂盒 小鼠增殖细胞核抗原试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠增殖细胞核抗原试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠增殖细胞核抗原试剂盒、小鼠增殖细胞核抗原eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human rheumatoid factor (RF) ELISA Kit 人类风湿因子(RF)试剂盒
Humancholyglycine,CGELISAKit 人甘胆酸(CG)试剂盒 96T/48T 进口分装
associatedproteinA,SP-A试剂盒大鼠肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)试剂盒规格:96T/48T
游离脂肪酸化学比色法定量试剂盒50次
MouseiactParathormone,i-PTHELISAKit小鼠全段甲状旁腺素(i-PTH)试剂盒规格:96T/48T
ECHDC1蛋白抗体
凋亡相关蛋白5抗体
COLEC10重组小鼠 COLEC10 蛋白 (Fc 标签) Protein
基质金属蛋白酶13(MMP13)重组蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)
FASLG重组人 Fas Ligand / FASLG / CD95L 蛋白 Protein
CD40LG Protein Human 重组人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白
ACVR1 Protein Canine 重组狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白 (Fc 标签)
基质金属蛋白酶13(MMP13)重组蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)
CD40LG Protein Human 重组人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白
COLEC10重组小鼠 COLEC10 蛋白 (Fc 标签) Protein
ACVR1 Protein Canine 重组狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白 (Fc 标签)
FASLG重组人 Fas Ligand / FASLG / CD95L 蛋白 Protein
小鼠羊膜胚胎细胞大鼠大内皮素(Big ET)试剂盒 ,英文名: Big ET ELISA Kit
Porcine adiponectin (ADP) ELISA Kit 猪脂联素(ADP)试剂盒
ELISA 小鼠白蛋白(mouse Albumin) 进口分装
CLIAKitforLN(HumanLaminin)ELISAKIT人层连蛋白/板层素
通用型DNA平滑末端连接克隆试剂盒10次
ELISAKitβ-lactamase鸡β内酰胺酶
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行
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