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更新时间:2024-11-05
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产品名称:兔皮脂腺细胞
组织来源:皮脂腺
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
培养信息:
包被条件:鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基:基础培养基,含FBS、EGF、Hydrocortisone、肾上腺素、甲状腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:上皮细胞样
传代特性:可传2-3代
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔皮脂腺体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳僀Ꝙ僀
细胞简介:
兔皮脂腺分离自皮脂腺组织;皮脂腺是由腺泡与短的导管构成的全浆分泌腺,皮脂腺导管开口于毛囊。除手外的其余部位皮肤中均有皮脂腺,前额、鼻、背上部的皮脂腺多,称为皮脂溢出部位。其余的部位比较少,掌、足趾及足背没有皮脂腺。皮脂腺大多位于毛囊及立毛肌之间,由一个或几个囊状的腺泡与一个共同的短导管构成。分泌部呈囊泡状,由多层腺细胞构成。腺泡周边紧贴基膜的细胞较小,呈扁平或立方形,称为基细胞。新生的腺细胞不断向中心移动,体积增加,胞质内的小脂滴越来越多,腺泡中心的细胞更大,细胞核固缩、细胞器消失,胞质内充满脂滴。后腺细胞解体并与脂滴同时排出,即为皮脂。皮脂腺的分泌因人种、年龄、性别及气候等因素而不同。10岁以前分泌力弱,16~35岁分泌旺盛,老年期减弱;夏天分泌旺盛,秋冬季分泌较少;过食油腻、辛辣刺激的食物以及按摩也可增加分泌。皮脂腺分泌旺盛,可导致皮肤油腻、皮肤粗糙、毛孔粗大,容易发生粉刺及脂溢性皮炎。皮脂腺,分泌皮脂过少,可导致皮肤干燥、脱屑、皮肤老化等,所以控制皮脂腺的分泌很关键。皮脂腺的活动也与多种皮肤疾病相关,例如: 皮脂腺数量或其活动的减少可能会导致皮肤干燥综合征,特应性皮炎是皮肤屏障功能障碍的炎症性疾病,研究发现其发病与皮脂腺功能减弱有关 ,毛周角化病的皮损中则没有皮脂腺。而皮脂分泌过多和寻常痤疮相关。同时现有研究分析结构化数据特征, 尝试探索皮脂腺与皮脂腺肿瘤发生的联系。
方法简介:
实验室分离的兔皮脂腺采用联合机械分离制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的兔皮脂腺经CK4免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养步骤:
一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
收到细胞如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作
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